产品货号：
GS2309
中文名称：
2×Taq PCR Mix(含红色染料)
英文名称：
2×Taq PCR Master Mix(with Red Dye)
产品规格：
1mL|5mL
发货周期：
1～3天
产品价格：
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本制品是一种即用型的溶液，包含Taq DNA聚合酶、dNTP、MgCl2、PCR buffer、PCR反应稳定剂、凝胶上样试剂和红色染料(柠檬黄和甲酚红)，因此PCR产物在PCR结束后可以直接进行琼脂糖凝胶电泳。产品目标是节省建立PCR反应的时间和降低污染的的风险。优化的Taq PCR Master Mix (2X，红色染料)能从λDNA中扩增长达5kb的目的片段。用户只需加入模板、水及引物即可建立PCR反应。提供的25mM Mg2+用于重新优化PCR系统，以期获得理想的PCR产物。
- 即用型，操作方便快捷，节省时间。
- 已加入Loading Buffer，PCR结束后可以直接电泳。
- 操作步骤少，减少交叉污染。
- 扩增效率高。
- 2×PCR Master通常适用于扩增5kb以下的片段。
| 组分 | 1mL | 5mL |
| 2×Taq PCR Mix(含红色染料) | 1mL | 5×1mL |
| Sterilized ddH2O | 1mL | 5×1mL |
| MgCl2 (25mM) | 0.5mL | 1mL |
保存：-20℃
- 根据下列条件来优化模板浓度：
基因组DNA 1～10μg/mL 质粒DNA 0.1～1μg/mL - 优化引物浓度：0.2～0.5μM的引物浓度适用于大多数PCR扩增反应。
- 试剂于冰上溶解。
- 根据下表准备反应体系：
成分 用量 终浓度 2×Taq PCR Mix(含红色染料) 25μL 1× DNA模板 1μL 参见步骤1 Primer F (10μM) 2μL 0.4μM Primer R (10μM) 2μL 0.4μM Sterilized ddH2O 至50μL - 将反应管置于离心机中离心30~60 s。
- 使用的PCR仪没有热盖功能，用矿物油覆盖反应液。
- 大多数PCR反应可使用下列循环程序：
过程 温度 时间 循环数 预变性 94℃ 4min 1 变性 94℃ 30s 30～35 退火 45～68℃ 30s 延伸 72℃ 1kb/min 终延伸 72℃ 10min 1
| 问题 | 分析 |
| 产物少或没有 | 模板浓度过低；实验样品DNA损伤或降解。 |
| 引物设计不完善。 | |
| 热循环条件未优化；退火温度过低或过高；延伸时间太短，循环次数太少。 | |
| 引物浓度过低；Mg2+浓度未优化。 | |
| 模板质量太差。 | |
| 产物为多条带 | 引物设计不完善。 |
| 引物浓度未优化或引物降解。 | |
| 退火温度过低。 | |
| PCR循环条件未优化。 | |
| 产物有污染 | 模板用量过多。 |
| Mg2+浓度未优化。 | |
| PCR中的长片段来源于长的基因组DNA。 | |
| 携带污染。 | |
| 引物设计不完善 |
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